APORTE DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR EN LA
IDENTIFICACIÓN DE PERSONAS
José Alarcón Guerrero
La biología molecular en primer lugar aporta evidencias para
reconstruir la filogenia de los seres vivientes y así demostrar que los
animales que existen en la actualidad están emparentados y descienden de
organismos antecesores, gracias a los avances
podemos hoy en día determinar parentesco entre una u otra especie y más
aún en el caso de los seres humanos podemos determinar si una guarda un
parentesco con otro ser humano. Las técnicas de la Biología molecular nos han
abierto puertas impensables hace algunos años. Con esto se ha avanzado los
sistemas de identificación de las personas, especialmente con la decodificación
del genoma humano.
Actualmente el análisis
del ADN ha revolucionado las técnicas de identificación, por lo que se presenta como un colaborador indispensable
para el Derecho pues es utilizado en la indagación de problemas en
criminalística como de paternidad y ser utilizado en la identificación de
personas.
En los organismos vivos, la información hereditaria es almacenada en el
ácido desoxirribonucleico (ADN), constituyendo éste el material genético
primordial. El ADN fue descubierto por Miescher en 1871, pero recién se lo
identificó como portador de la información genética a mediados del siglo
pasado. En 1953, Watson and Crick sugieren un modelo tridimensional para su
estructura y mecanismo de replicación, confirmados posteriormente. El ADN es
una molécula bicatenaria, constituida cada cadena por la secuencia de unidades
químicas denominadas nucleótidos. Cada nucleótido está compuesto por una
pentosa, la desoxirribosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada.
a) Técnica RFLP (polimorfismo de longitud de
fragmentos de restricción)
Era
la técnica más usada cuando se disponía
de una cantidad suficiente de mate rial biológico para
analizar, de allí que era la técnica de opción para la determinación de la
paternidad y filiación. El RFLP, consiste en la extracción del ADN de una muestra biológica, cortados específicamente con enzimas de restricción (endonucleasas
de restricción), obteniéndose fragmentos de longitud variables entre una persona y otra. Los fragmentos de ADN son separados por electroforesis en geles; y posteriormente transferidos a una membrana, manteniendo sus posiciones.
La membrana es tratada con una sonda de ADN al
que se unirá en sitios específicos a
los fragmentos de ADN cortados. La interpretación es realizada por la comparación
de inclusión y exclusión de bandas de
ADN. En análisis por RFLP, las «huellas digitales» individuales y específicas del ADN
pueden ser obtenidas siempre que el ADN no este degradado y esté presente en cantidades suficientes. Se requiere no menos
de 50 ng. de ADN para análisis por RFLP, usando una muestra de un sólo locus, y más de 1000 ng. si hace de un análisis de muestra de varios loci. Sin
embargo, en la práctica cantidades de
ADN no son obtenibles de las evidencias biológicas forenses.
Más aún, el RFLP consume una gran
cantidad de material para analizar y muestras no pueden ser
reanalizadas.
b) Técnica PCR (reacción en cadena de la polimerasa)
Esta poderosa técnica consiste en
replicar a la molécula de ADN y permite obtener millones de copias de moléculas
de ADN a partir de una molécula ADN original
en tubo de ensayo. Actualmente se utilizan los termocicladores o cicladores
térmicos, que son aparatos que automatizan el sistema y en menos de 24 horas se disponen de los productos de ADN
amplificados, los que posteriormente son separados por electroforesis en
geles. La interpretación es realizada por la comparación de bandas de ADN
obtenidas.
La
aplicación de esta técnica es mayormente para resolver casos criminalísticos
con hechos de sangre y violaciones sexuales en los que pueden hallarse evidencias
biológicas en pequeña cantidad como indicios. Utilizando
el método PCR, trabajando muy cuidadosamente, se hace posible ahora determinar el ADN de un simple cabello
con raíz, de una simple célula
diploide (célula bucal), o incluso de un espermatozoide aislado. También debido
a que la PCR puede generar un gran número de copias de una secuencia específica de ADN, los métodos usados para la
detección de polimorfismos de ADN son más simples y consumen menos
tiempo que el análisis por el método RFLP.
Para
obtener el máximo beneficio para el científico forense un sistema de marcador genético para el PCR forense debe reunir
las siguientes características:
·
El marcador debe ser altamente
polimórfico, y debe tener un alto nivel de heterocigoticidad genética.
·
La secuencia blanco debe ser fácil y específicamente
amplificada.
·
Los métodos de detección de las
variaciones alélicas deben ser poco complicados y muy confiables.
·
Los datos de la población de las frecuencias
genotíficas deben estar disponibles, para asignar estimados al poder de
discriminación de los marcadores y la probabilidad de una falsa inclusión.
·
Los sistemas de marcadores deben
ser inherentemente independientes, de tal forma que las
frecuencias derivadas de un sistema marcador pueda ser multiplicada con aquellas
de los otros, incrementando así el poder discriminativo. Una cantidad de sistemas de tipificación altamente infoiniativos basados en PCR están en desarrollo, lo que haría que el análisis PCR sea más útil en la identificación individual. Más Aún, los métodos
de detección en los métodos PCR son
rápidos, simples, y no requieren el uso de radioisótopos.
IDENTIFICACIÓN DE PERSONAS POR ANÁLISIS DE ADN
Si tomamos el ADN de una persona
como referencia y lo comparamos con el de otras personas, de cualquier origen y
raza, veremos que hasta el 12% puede cambiar porque muchos de los fragmentos de
la larga cadena se comportan de forma aparentemente extraña, unos están
colocados en un lugar que no les corresponde, otros desaparecen sin explicación
y en especialmente, una gran cantidad se repiten muchas veces.
Cuando se estudia el genoma humano,
se identifica dentro de las regiones que todas las personas tenemos y se
comprueba que estas son variables en el número de copias, en las distintas
personas, que son repeticiones de “ párrafos ” del ADN que aparecen en algunas
personas más que en otras, son regiones de tamaño considerable. Por otra parte
cada individuo presenta una pequeña parte que lo identifica como único y
exclusivo, entonces es precisamente ahí donde se enfoca el estudio de la
identificación por medio del ADN.
El análisis del ADN es una técnica que se realiza en cualquier
célula extraída del organismo (tejidos, sangre, saliva, pelos, líquido seminal
o vaginal, etc.) o de restos descompuestos, momificados y aun calcinados. Su
investigación se basa en el fraccionamiento del ADN, mediante enzimas de
restricción, obteniendo fragmentos característicos en cada persona.
De
lo dicho se deduce claramente la importancia que tienen los perfiles de ADN
como sistema infalible de identificación, pues las características, como son su
transmisibilidad hereditaria, procede en partes iguales de su padre y madre, lo
que determina su superioridad como método de individualización respecto de
otros tipos de huellas, su universalidad, se encuentra presente en el ADN de todas
las células y que se trata claramente de un mecanismo privilegiado de
identificación.
Pero para esto es necesario contar
con un banco de datos, que en nuestro caso peruano es necesario ir equipando ya
que es necesario contar con este sistema para poder comparar el perfil genético
de cada persona y de esta manera sea la identificación en un menor tiempo y sin
errores porque donde se encuentre ADN “viable” va a ser posible la
identificación de una persona. Las estadísticas
de las pruebas moleculares se refieren a las probabilidades de que dos personas
compartan
las mismas «Huellas Genéticas» son prácticamente nulas, las variaciones de un
individuo a otro son, muy grandes
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